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高解析Orbitrap質譜儀串聯液相層析暨晶片電泳分析系統（CE/LC-MS）

 

儀器照片
一、儀器設備說明

高解析Orbitrap質譜儀串聯液相層析暨晶片電泳分析系統（CE/LC-MS）
2017年12月裝機完成，2018年3月開放服務。

廠牌及型號：

  1. Q-Exactive Plus（Thermo Fisher Scientific）高解析度軌道阱質譜儀
  2. Zipchip毛細管電泳整合型游離源（908Devices）
  3. Ultimate 3000 UHPLC System超高壓液相層析系統

儀器規格：

  1. 高解析四極桿傅立葉轉換電場軌道質譜儀（High Resolution Q-Exactive Plus）
    儀器設計：同時包含四極桿式（Quadrupole）及傅立葉轉換電場軌道阱（Orbitrap）分析器。
    (1) 離子傳輸元件（Ion Optics）：
         ►具有S-LENS 設計，有效提高傳輸效率
         ►包括可獨立加熱式離子毛細管（Ion transfer tube）
    (2) 四極桿分析器：
         ►為HyperQuad mass filter
         ►Isolation width selection from 0.4 Da to full mass range
    (3) 真空系統（Vacuum System）：包括渦輪幫浦（turbo pump）及旋轉幫浦（rotary pump），真空度可達 ≦ 1x10-9mbar。
  2. 超高壓液相層析系統（UHPLC Systems）
    儀器設計：同一模組內，具有兩種不同流速範圍之幫浦，奈升級幫浦NanoPump與毫升級幫浦MicroPump一組。具備自動進樣系統及管柱恆溫箱。經由串接加熱式電噴灑游離源（H-ESI）及奈升級電噴灑游離源（NSI）方式，導入質譜儀中，執行超高壓液相層析串聯質譜儀檢測功能。
    (1) 可使用Xcalibur 軟體控制。
    (2) 自動進樣系統AutoSampler 溫控範圍4-45℃。
    (3) 管柱恆溫箱Column Compartment 溫控可達75℃。
    (4) 奈升級幫浦NanoPump 耐高壓 >11,000psi。
    (5) 毫升級幫浦MicroPump 耐高壓達8,500psi。
  3. 離子源（Ion Source）
    儀器設計：
    加熱式電噴灑游離源（H-ESI）：流速範圍可達1 µL/min至1 mL/min，加熱可達450℃。
    奈升級電噴灑游離源（NSI）：流速範圍可達10 nL/min至1,000 nL/min，在大氣壓力模式下操作。
    毛細管電泳整合型離子源（ZipChip）：分析晶片系統結合電噴灑離子源、毛細管電泳分析晶片。
  4. 檢測器（Detector）
    (1) 具全質量掃描（Full Scan MS）。
    (2) 二次全質譜質量掃描（Full Scan MS/MS）。
    (3) 具選擇離子監控（target Selected Ion Monitoring，t-SIM）、數據依賴擷取法（DDA）、非數據依賴擷取法（DIA）、全離子碎片法（AIF）、平行反應監測法（Parallel Reaction Monitoring，PRM）等功能。
    (4) 質量範圍（Mass Range）：質量範圍設定m/z 50~8,000。
    (5) 掃瞄速率（Scan Rate）：≦12 Hz。
    (6) 質量分辨率（Mass Resolution）：最高可達280,000 FWHM 解析度。
    (7) 極性切換（Polarity Switching）：正負離子切換 <1 sec。
    (8) 質量精確度（Mass Accuracy）：質量外校誤差（external error）<3 ppm，質量內校誤差（internal error）<1 ppm。
    (9) Multiplexing 技術可同時選擇最多10 個 Using Ion-Routing Multipole 10 precursors。
    (10) 裂解技術：更高能量碰撞誘導解離（HCD）。
    (11) 靈敏度（Sensitivity）：注入30 fg 標準品（Buspirone） on column，SIM mode 靈敏度訊噪比（S/N）>100。
二、服務項目
一般分析或定性分析項目：
  1. 分子量測定：以質譜測定純化過的化合物分子量。
  2. 單一成分高解析ESI-MS/MS：以質譜測定純化過的化合物分子量及二次質譜圖（可包含in-source CID測試或量測）。
  3. 額外選定離子ESI-MS/MS：以質譜測定指定離子的二次質譜圖。
  4. LC-MS分析（大、小分子）：
    (1) 跑40min LC分離梯度，並連接質譜偵測 (Full-MS, DDA, or DIA)。（樣品需先純化）
    (2) 跑1hr LC分離梯度，並連接質譜偵測 (Full-MS, DDA, or DIA)。（樣品需先純化）
  5. 蛋白質身分鑑定分析：以Nano LC-MS/MS 分析蛋白質。
  6. 蛋白質藥物結構分析：使用LC-MS 或 ZipChip CE-MS分析，包含
    (1) Full sequence
    (2) N- or C-terminal sequence
    (3) Disulfide linkage
    (4) N-glycosylation sites and glycan structures
    (5) O-glycosylation sites and structures
    (6) Post-translational modification: such as deamidation and oxidation
其它：
  1. 資料庫搜尋：將Protein ID分析所得peptide fragmentation data數據進行database search
三、取樣應注意事項
  1. 本儀器不分校內校外，一律公開開放使用，並依照國科會相關管理規則辦理。
  2. 本分析服務單位不接受放射性或生物感染性樣品。
  3. 可接受樣品之儲存狀態有：粉末狀態、水溶液狀態；可全溶於可揮發性buffer（如甲醇、乙腈、異丙醇、水或是低濃度NH4HCO3、NH4OAC等buffer）。
  4. 晶片電泳分析樣品：需全溶於pH2~3的上開buffer系統。
  5. 樣品中禁止含有界面活性劑、磷酸、硫酸、無機酸鹽類或非揮發性鹽類；若因送測樣品中含此類物種而造成機器損害，送測者須負相關賠償責任。（膠內酵素水解樣品最後需經C18 cartridge或是ZipTip去鹽，才可送至本分析單位進行分析。）
  6. 蛋白質、胜肽分子量測定或是蛋白質鑑定之樣品（膠體消化樣品、水溶性消化樣品）建議總量為5~100pmole。小分子測定之樣品需有1mg以上的樣品進行分析。
  7. 進行蛋白質鑑定之樣品，請註明樣品來源種類（例如：human、rattus...等）。
  8. 本實驗室一律以-20℃儲存送測樣品，如需其它特殊儲存方式請另行告知。
  9. 本分析服務單位不負責於運送過程中的損害。
  10. 自備管柱者，請先提供壓力、溫度及pH值適用範圍。
  11. 自行操作者，請自備上機用手套、內插管（或vial瓶）、瓶蓋，使用完應將儀器復歸，並自行處理圖譜。
  12. 自備LC：有長期或特殊需求而自備LC，儀器串聯需經專業風險評估，不得損壞或影響質譜儀或相關儀器運轉；如有損壞，應予賠償。
四、收費辦法及標準
以國家科學及技術委員會-基礎研究核心設施預約服務管理系統為主，請上線查閱：儀器計費查詢。

 

用戶獎勵方案：

  1. 大宗件 (>10件，每件25% off)：請提供樣品資訊，甚至層析條件
  2. 本儀器「用戶質化成果獎勵辦法」（paper致謝優惠）：獎勵於SCI、EI、IEEE收錄期刊接受發表之論文（提及NCKU及本儀器者），請於發表年度提出，按篇數累計IF值（或領域Ranking），提供用戶獎勵優惠：依中心公告為準
  3. 自行操作：按照國科會-基礎研究核心設施預約服務管理系統費率計費
  4. 資料庫重複比對（第二重複(n=2)：12% off: 、第三重複(n=3)：25% off）：比對結果以提供csv檔為主
五、聯絡方式
  姓名 電話 電子郵件
技術員 徐光毅 先生

06-2757575轉31339

 z11008108@ncku.edu.tw
樣品寄送 地址：701401 臺南市東區大學路1號力行校區生科大樓89913室  生科產業系陳盈嵐實驗室收
六、儀器放置地點

701401 臺南市東區大學路1號 力行校區 生物科技大樓11樓89B05室
七、申請表格及注意事項
  • 1.請至國科會系統預約並填寫樣品資訊和分析需求後送樣至實驗室，依送樣順序服務。
    2.若有不確定事宜可以來電或來信諮詢。

     
八、參考資料
九、相關儀器
十、致謝函

親愛的使用者 / Dear User：
感謝您使用成大貴儀中心【Q-Orbitrap MS (QE Plus; CE/LC-MS)】，若是我們的工作對您的期刊、論文、著作確實有所助益，為提供本中心儀器之持續服務與品質，凡發表期刊或碩博士論文著作中有使用本中心儀器所擷取資料者，煩請在誌謝處提及使用儀器單位之名稱：Q-Orbitrap MS (QE Plus; CE/LC-MS), Instrumental Center, NCKU，致謝的中英文範本如下：/ Thank you for using the Q-Orbitrap MS (QE Plus; CE/LC-MS) of the NCKU Instrument Center. If our work is really helpful to your journals, papers, and works, any publish journals or doctoral papers with records obtained by using our instruments in the works, please mention our contribution in the acknowledgement. For example:
（中文 / Chinese）
作者衷心感謝使用國立成功大學貴重儀器使用中心的高解析Orbitrap質譜儀 (QE Plus; CE/LC-MS)。
（英文 / English）
The authors gratefully acknowledge the use of Q-Orbitrap MS (QE Plus; CE/LC-MS) belonging to the Instrument Center of NCKU.

相關問題，可與我們聯繫

Regards

[技術手冊]

 

 

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